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以下是關(guān)于大鼠CXC趨化因子受體3(CXCR3)ELISA試劑盒實驗的綜合使用說明:
BS-3181 大鼠CXC趨化因子受體3(CXCR3)ELISA試劑盒
一、試劑盒組成
預(yù)包被96孔板?(含CXCR3抗體)
標(biāo)準(zhǔn)品?(凍干粉,需用稀釋液重構(gòu))
檢測溶液A/B?(生物素化抗體與HRP標(biāo)記親和素)
TMB底物?、終止液(硫酸溶液)
濃縮洗滌液?(需20-30倍稀釋)
二、樣本處理
血清/血漿?:采集后離心(1000×g,15-20分鐘),避免溶血或反復(fù)凍融。
組織勻漿?:PBS洗滌后勻漿,離心取上清。
保存條件?:短期(48小時)可存于2-8℃,長期需-20℃/-80℃分裝。
三、實驗步驟
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋?
梯度稀釋法:從原液(如40ng/ml)開始倍比稀釋至5-7個濃度。
加樣與孵育?
每孔加樣50μl(樣本需預(yù)稀釋),37℃孵育30分鐘。
洗滌?
使用稀釋后洗滌液,重復(fù)洗板5次,拍干。
顯色與終止?
加入TMB底物避光顯色10-15分鐘,終止后450nm測OD值。
四、注意事項
溫度控制?:試劑使用前需室溫平衡30分鐘。
避免污染?:使用一次性吸頭,不同批次試劑勿混用。
數(shù)據(jù)準(zhǔn)確性?:顯色過深需提前終止,標(biāo)準(zhǔn)曲線需包含空白對照。
五、結(jié)果計算
以標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo)繪制曲線,樣本濃度通過曲線擬合計算。
注:以上資料僅供參考,如需具體品牌試劑盒的差異操作(如天津本生,天正信達(dá)等),可進(jìn)一步提供廠商信息以細(xì)化步驟。
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