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本生詳述:胎牛血清試驗(yàn)中的常見問題
更新時間:2021-08-11瀏覽:1694次

  胎牛血清試驗(yàn)中的常見問題

  怎樣貯存和凍住血清才不會使產(chǎn)質(zhì)量量受損?

  將血清從冷凍箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室溫下使之全融。但有必要留神的是,融解過程中有必要規(guī)矩地?fù)u晃均勻。

  長時間貯存在2-8℃時,血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)或許調(diào)集而構(gòu)成堆積或可見的混濁。因此,推薦在-20℃以下貯存血清,并防止重復(fù)凍融。

  我們主張血清應(yīng)保存在-2O℃。若存放于4℃時,請勿跨越一個月。若一次無法用完一瓶,主張無菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi),再放回冷凍。

  血清中包括絮狀堆積,它們是什么,怎樣處理?

  堆積包括纖維蛋白和脂蛋白。這是正常特性,不會影響產(chǎn)品性質(zhì)。要除去堆積,離心血清(400g,1-2分鐘)或許簡略的讓其堆積在瓶子底部,將血清當(dāng)心的轉(zhuǎn)移到另一個無菌瓶里(一般不主張選用過濾的辦法除去堆積,由于堆積會阻塞濾膜而無法過濾)。大多情況悄悄搖晃堆積并加熱至37℃就會再溶解。所以,運(yùn)用產(chǎn)品時要搖晃并加熱血清至37℃,堆積會天然消失。

  試驗(yàn)室怎樣挑選適合的血清?

  國內(nèi)一同認(rèn)為HYCLONE的血清是好的,可是根據(jù)我在北美的經(jīng)歷,國外一般認(rèn)為GIBCO比HYCLONE好,所以并不是價格抉擇質(zhì)量,可是總的來說這兩種價格遍及偏貴,一般不是太嬌氣的細(xì)胞,國產(chǎn)的就夠用了。此外,由于國內(nèi)HYCLONE,GIBCO并沒有生產(chǎn)線,我們只能從代理商那里買,而代理商又魚龍混雜,所以買到假貨的或許性也很大。所以,我一般會從直銷員那里買血清,有的國外生物公司由于剛剛進(jìn)入中國,zhi名度不高,可是其實(shí)在國外現(xiàn)已做得很不錯了,如Wisent等,他們在國內(nèi)有辦事處,我會從那里拿,血清的質(zhì)量和HYCLONE等量齊觀,但價格相對優(yōu)惠許多。

  怎樣防止血清中產(chǎn)生堆積?

  按如下操作可防止堆積的產(chǎn)生:

  (1)凍住血清時,請隨時將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少堆積的產(chǎn)生。

  (2) 血清分裝凍存時,須規(guī)矩?fù)u晃均勻(當(dāng)心勿構(gòu)成氣泡),使溫度與成分均一。

  (3) 勿直接由-20℃直接至37℃凍住,因溫度改動太大,血清簡略構(gòu)成蛋白質(zhì)凝聚而產(chǎn)生堆積。

  (4) 勿將血清置于37℃太久,否則血清會變得污濁,一同血清中許多較不穩(wěn)定的成份也會因此受到破壞,然后影響血清的質(zhì)量。

  (5) 血清的熱滅活非常簡略構(gòu)成堆積物的增多,若非必要,可以無須做此過程。

  (6) 若有必要做血清的熱滅活,請遵守56℃,30分鐘的準(zhǔn)則,而且隨時搖晃均勻。溫度過高,時刻過久或搖晃不均勻,都會構(gòu)成堆積物的增多。

  血清保存和運(yùn)用須留神:血清應(yīng)保存在-5℃至-20℃,若存放在4℃不行跨越一個月。凍住血清時 ,應(yīng)先將血清至于2-8℃冰箱,并常常搖勻使之溶解,然后至室溫放置使之升溫,絕對不行將冷凍的血清直接放入37℃水浴或許溫箱中,如放在37℃凍住,色彩加深,粘稠度也會添加,血清在凍住和熱滅活后,應(yīng)按用量分裝并于-20℃保存,防止重復(fù)凍融。

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